阳性血清对照 0.08ml 0.04ml 0.02ml 0.01ml
阴性血清对照 0.08ml 0.04ml 0.02ml 0.01ml
血清样品1 0.08ml 0.04ml 0.02ml 0.01ml
血清样品2 0.08ml 0.04ml 0.02ml 0.01ml
b试验前，先将待检血清、标准血清和抗原置于室温，使其达到20℃。
B将待检血清、标准血清按上表中的量，垂直接触玻片分别加到各方格内。
C摇匀抗原，每一血清格内分别垂直加入0.03ml抗原。
D自0.01ml血清格开始，用牙签将抗原与血清完全混合，摊开直径2CM左右，依次至0.02ml、0.04ml、0.08m血清格，一个血清样使用一牙签。
E轻轻摇动玻片后，室温静置5—8min。春冬季节室温较低时，可置于30℃左右的温箱中。
F记录结果
出现大凝集片或小粒状物，液体完全透明，即100%凝集。
有明显凝集片和粒，液体几乎完全透明，即75%凝集。
有可见凝集片和颗粒，液体不甚透明，即50%凝集。
1.2.3 猪伪狂犬检测方法：乳胶凝集试验
操作步骤
取待检样品、阳性/阴性对照血清和稀释液各一滴，分别置于玻片上，各加一滴乳胶抗原，用牙签或火柴棍搅拌，并轻轻摇动1—2min后，于3—5min内观察结果。
也可将血清作倍比连续稀释，每个稀释度加乳胶抗原进行定量分析。
C判定结果：
A所有对照成立，即阳性血清呈“ ”，阴性血清和稀释液呈“—”，试验方有效。样品出现“++”以上者为阳性。
1.2.4 猪细小病毒检测方法：乳胶凝集试验。
2 调查内容
2.1 流行病学调查：通过查阅记录，调查种源、胎次，发病的季节性。
2.2 饲养管理调查：主要包括饲料质量，营养成份，有无霉变；有无环境、机械等不良因素引起的，防疫、免疫、消毒是否落实到位。
2.3 临床病例剖解：包括对繁殖母猪的临床检查及对发病母猪所产部分弱仔及新生病仔猪的病理剖检观察。
2.4 血清学检测：对采得的212份血清样品进行蓝耳病抗体检测和部分血清的伪狂犬、猪瘟、猪细小病毒检测。
2 检测结果及讨论
3.1发生繁殖障碍的母猪有长白、约克及长白╳约克，发病母猪没有明显的品系差别；发病的胎次主要集中在第一胎，在第一胎过后，很多母猪不再表现明显的繁殖障碍病(说明在第一胎过后产生了抗体对该病有一定的免疫保护力)；发病没有季节性，一年四季均可发病；发病猪主要表现产死胎、木乃伊胎、弱仔和新生仔猪发病死亡。
3.2 猪场的饲料基本上都统一饲喂母猪专用料，不存在霉变和质量问题，也无环境或机械因素引起的流产和死胎。在采血检查时除两家猪场拿不出严格的免疫记录档案外，其他猪场都按免疫程序进行了免疫，并做到定期消毒。
3.3 剖检弱仔和新生病仔猪，大体表现一致，体表贫血苍白，皮下脂肪多黄染，肾呈土黄色，在表面有小出血点，有的淋巴结水肿出血呈大理石样状，心包积液，小叶性肺炎，肝褐黄色。
3.4 血清学检测结果：
母猪繁殖障碍疾病血清学检测统计表
猪场 蓝耳病 伪狂犬 细小病毒 繁殖障
碍病史
样品数 阳性数 阳性率 样品数 阳性数 阳性率 样品数 阳性数 阳性率
1场 35 10 28.6% 14 8 57.1% 14 6 42.9% 11头流产、死胎、木乃伊胎
2场 32 7 21.9% 17 10 58.8% 17 8 47.1% 记载不详
3场 14 5 35.7% 14 10 71.4% 14 9 64.3% 14头流产、死胎、木乃伊
4场 20 14 70.0% 20 14 70.0% 20 16 80.0% 4头发流产
5场 26 13 50.0% 13 11 84.6% 13 9 69.2% 记载不详
6场 13 2 15.4% 13 6 46.2% 13 7 53.8% 9头流产、死胎、弱仔、木乃伊、
7场 9 1 11.1% 9 6 66.7% 9 5 55.6% 1配不上种、1头产死胎、7头流产、弱仔
8场 11 0 0.0% 11 8 72.7% 11 8 72.7% 11头流产、死胎、木乃伊、弱仔
9场 12 7 58.3% 12 6 50.0% 12 7 58.3% 12头流产、死胎、弱仔、木乃伊
10场 7 2 28.6% 7 6 85.7% 7 4 57.1% 7死胎、木乃伊
11场 7 3 42.9% 4 2 50.0% 4 3 75.0% 7头发生过流产、死胎、木乃伊
12场 24 16 66.7% 24 20 83.3% 24 17 70.8% 24头发生过流产、死胎、弱仔
13场 2 0 0.0% 2 2 100.0% 2 1 50.0% 2头后备发病猪
合 计 212 80 37.7% 160 109 68.1% 160 100 62.5% 110头繁
殖障碍
4 小结与分析
4.1 通过流行病学、饲料、饲养管理和对弱仔、新生病仔猪剖检等各个方面的调查，排除了母猪繁殖障碍病因为品种、种源、饲料和饲养管理因素造成的可能。因为剖检有一定的病理变化，说明是由病毒或病原微生物等致病因素引起。
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